E-mail | SIS | Moodle | Helpdesk | Knihovny | cuni.cz | CIS Více

česky | english Přihlášení



Laboratoř sekvenace DNA

PORUCHA SEKVENÁTORU VE VINIČNÉ 18.4.-22.4.
Prosíme odložte zasílání vzorků na FRAGMENTACI.

PROGRAM GENEIOUS - platnost licencí Geneious byla prodloužena na další rok (do konce srpna 2024).


GENEIOUS PROGRAMME - Geneious licences have been extended for another year (until the end of August 2024).

PROGRAM GENEIOUS - Máme zakoupeno 25 licencí programu Geneious. Můžete si pravidelně stahovat vždy i tu nejnovější verzi. Noví uživatelé - pro přístupové údaje kontaktujte laboratoř seqlab()natur.cuni.cz. Licence fungují buď přímo z fakultních počítačů nebo přes vzdálený přístup z domova, o který si musíte zažádat na CIT.

AKTUALIZACE!!
Příjem vzorků na sekvenaci v laboratoři OMICS - Genomika probíhá standardně v pondělí, ve středu a v pátek v 8 hodin.
The sequencing laboratory works in the usual way, the transfers take place again on Monday, Wednesday and Friday at 8:00.

Sběrná lednička ve Viničné
POZOR, od 11. 5. 2020 změna času převozu v pondělí !

Převoz vzorků z Viničné do Biocevu:
po - ráno = vzorky do 8.00
st - ráno = vzorky do 8.00
pá - ráno = vzorky do 8.00
ostatní dny - příležitostně
Vzorky můžete do lednice ukládat průběžně, buďte bez obav, i týden vydrží bez problémů.

Všechny SEKVENACE jsou zpracovávány v Biocevu. Vzorky dávejte do označené krabice v lednici a pro jistotu označte sáček SQ.
Fragmentační analýza zůstává na zpracování ve Viničné 7, stále na stejném přístroji. Vzorky dávejte do mrazáčkové poličky a pro jistotu označte sáček FR.

Pokud reakce neproběhla, něco je špatně. Neposílejte tytéž vzorky připravené stejným způsobem, nebude to lepší! Zkontrolujte na novém nanodropu čistotu (hl. u PCR fragmentů). Zkontrolujte, zda máme správné primery (hl. u plasmidů). Konzultujte nastalou situaci s námi a zašlete zvlášť DNA a primery. Koncentraci a čistotu DNA ještě přeměříme a případně DNA přečistíme a sami sekvenační reakci namícháme.

Prosíme dodržujte:
1 sample = 1 tube (0,2ul) = 1 row in sample sheet

DOPORUČENÍ PRO PŘÍPRAVU  VZORKŮ NA SEKVENAČNÍ REAKCI.
KONCENTRACE: 5ng/100pb u PCR produktů a 3ng/100pb plasmidové DNA  (započítává se celá délka plasmidu), odpovídá 100-200ng do reakce (max. 300ng u velkých plasmidů). Pokud vám sekvenace chodí dobře, koncentraci samozřejmě neměňte!
V sekci užitečné informace je nově část NEJČASTĚJŠÍ PROBLÉMY.
Stahujte si, prosím, aktuální průvodky.

Doručovací adresa:
Štěpánka Hrdá, Core facility - Genomika, PřF UK, Biocev, Průmyslová 595, Vestec, 252 50.
Konzultace na fakultě po domluvě.

Box na vzorky v Biocevu najdete vedle recepce - schránka je označena fialově (pozor - pod ní je zelená schránka soukromé firmy).

Vzorky pro Macrogen nadále nebudeme odesílat. Odeslání si zajišťuje každý sám uložením své objednávky do sběrného boxu Macrogenu, který je umístěn v budově Benátská 4, na sekretariátu katedry botaniky, naproti vstupním dveřím. Je k dispozici všem zaměstnancům a studentům PřF UK. Vzorky s vytištěnou objednávkou se vloží do jakéhokoli uzavíratelného sáčku a ten se umístí do sběrného boxu (není žádný požadavek na minimální počet vzorků). Každé úterý a čtvrtek večer bude sběrný box zkontrolován kurýrem UPS a všechny vzorky budou zaslány do Macrogenu.  

V laboratoři v Biocevu ve Vestci máme přístroj MiSeq Illumina, na kterém můžeme analyzovat Vámi připravené knihovny. Vybrané knihovny jsme schopni pro Vás také připravit.
Laboratoř dále nabízí
  1. sonikaci na ultrasonikátoru Covaris M220, včetně sonikačních minizkumavek - objem 50 nebo 130 ul.
  2. přesné měření kvantity DNA/RNA na fluorimetru Quantus.
  3. analýzu na přístroji Agilent 2100 Analyzer - cena dle typu čipu na doptání. Čipy jsou na 11-12 vzorků. Při menším počtu vzorky uskladníme do doby, než se čip zaplní.

Laboratoř poskytuje servisní služby v oblasti sekvenační a fragmentační analýzy DNA jak pro vědecké pracovníky a studenty biologické sekce  PřF UK, tak i pro všechny ostatní zájemce z univerzitních a akademických pracovišť.
Samostatná laboratoř sekvenace DNA vznikla v roce 2003. V současnosti jsou v laboratoří tři analyzátory:  čtyřkapilární 3130 Genetic Analyzer (2007), šestnáctikapilární 3130xl Genetic Analyzer (2010) a dvacetičtyřkapilární 3500 Genetic Analyzer (2015) od firmy Applied Biosystems.

Nabízíme:
1. Sekvenaci plasmidů a PCR produktů zahrnující sekvenační reakci a analýzu na genetickém analyzátoru (Nesekvenujeme PCR produkty kratší než 100pb a genomovou DNA, fosmidy a kosmidy, neboť na ně nemáme vypracovanou spolehlivou metodiku. Pokud však budete mít zájem, můžeme to zkusit.)
2. Analýzu již hotových přečištěných sekvenačních produktů
3. Fragmentační analýzu
4. Možnost využívání přístroje Nanodrop® v laboratoři S003 ve II. suterénu ve Viničná 7 nebo v místnosti M1.024 v BIOCEVU ve Vestci
5. Možnost využívání přístrojů sekvenátoru Miseq, sonikátoru Covaris, bioanalyzátoru Agilent a fluorometru Qvantus, stejně jako vybavení laboratoře pro přípravu knihoven v BIOCEVU.
6. Možnost vyhodnotit své výsledky u nás v laboratoři programy firmy Applied Biosystems SeqScape® Software a GeneMapper® Software.
7. Laboratoř má zakoupeno 30 síťových licencí programového balíku Geneious .Přístup k programu je možný z počítačů připojených na intranet, přístupové heslo interním uživatelům na vyžádání pošleme.


Akce dokumentů